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Plates-formes techniques
PRESENTATION :
Le
plateau d’histologie comporte un module destiné exclusivement à la
microtomie. Ce module abrite différents microtome :
cryomicrotomes (coupes histologiques à congélation
dans le cas d’une étude en microscopie
optique ) et ultra-microtomes (coupes histologiques
dans le cas d’une étude ultrastucturale
en microscopie électronique). Il est ouvert à tous
les membres de l’INM, mais aussi à la
communauté scientifique Montpelliéraine. |
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EQUIPEMENTS :
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Cryostats Leica : 2 cryostats
Leica (2800E Frigocut, CM3050) qui permettent de réaliser
des coupes à congélation d’une épaisseur
variant de 4 µm à 16 µm. |
Ces cryostats sont des dispositifs
cryogéniques qui permettent de maintenir une température
allant de 10°C à -50°C, dans une zone
d'expérimentation thermiquement isolée
de l'extérieur. Un microtome est logé à l‘intérieur
de cette enceinte et permet de réaliser des coupes
dans des tissus durcis par la congélation (de
4 µm à 30 µm), sériées
ou non sériées, sur tissus fixés
ou non fixés.
Les applications en microscopie optique peuvent être diverses, allant
de la simple coloration structurale, à l’immunohistochimie avec
un choix de traceurs très variés : les fluochromes en marquages
multiples, les enzymes en double marquages, l’or et l’argent colloïdal
en double marquage. C’est aussi une technique de choix pour l’hybridation in
situ. |
Ultra-microtomes Leica :
2 ultracuts Leica qui permettent de réaliser
des coupes semi-fines (de 0.5 µm à 2 µm)
mais aussi des coupes ultrafines (de 50 à 100
nm) observables en microscopie électronique à transmission.
L’ultramicrotomie est essentielle à l’observation
en microscopie électronique des organes intracellulaires
(mitochondries, golgie, noyau,..). Les applications sont
multiples : contrôles histologiques classiques
mais aussi immunohistochimie en simple ou double marquage
dites d’ « avant-inclusion ou après-inclusion » enzymatique,
or colloïdal… |
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Petits matériels de coupes à disposition :
Deux Knifes-maker Leica. Ces
appareils servent à la fabrication de couteaux
de verre pour l’ultramicrotomie avec une feuille
de verre, découpée en forme de bandes
spécialement choisies d’une largeur de
25 ou 38 mm. |
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Des couteaux de diamant fabriqués à partir
de diamants bruts naturels. Ils sont utilisés
pour la réalisation de coupes dont les épaisseurs
varient de 30 à 250 nm pour les coupes ultrafines
et de 250 nm à 5 µm pour les coupes semi-fines.
Des grilles support
pour les études en microscopie électronique. |
PRESTATIONS :
Une technicienne « prestataire de service » à temps
plein réalise des coupes à congélation à partir
de différents tissus pour tous les membres de
l’INM et les membres extérieurs (IFR3,
U844, …) : muscle, os, cochlée, œil ,
moelle épinière, cerveau… |
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Globe oculaire |
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Des formations théoriques et techniques
sont assurées à tous les membres de l’INM
et à tous les utilisateurs extérieurs.
Une documentation spécifique est à disposition
de tous sur le site intranet de l’INM et sur Internet
(en français et en Anglais). La réservation
des différents appareils ainsi que les demandes
de coupes de tissus s’effectuent « on
line » sur le site Intranet. Une veille technologique
est assurée pour mettre à la disposition
des utilisateurs du matériel de qualité et
de haute performance.
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| Epithélium olfactif |
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LA JOUVENCE :
L’acquisition
d’un nouvel appareil, Cryostat Leica (17K€),
devrait permettre de répondre à la demande
grandissante des utilisateurs actuels et futurs.
Le plateau d’histologie/immunocytochimie/microtomie
devrait être rattaché à la plate
forme RIO avec l’arrivée prochaine du service
de microscopie électronique. Cette restructuration
va considérablement favoriser l’ouverture
du plateau à toute la communauté scientifique
montpelliéraine. |
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Cochlée |
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