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Plates-formes techniques


Microtomie

Responsable : Chantal RIPOLL

PRESENTATION :

Le plateau d’histologie comporte un module destiné exclusivement à la microtomie. Ce module abrite différents microtome : cryomicrotomes (coupes histologiques à congélation dans le cas d’une étude en microscopie optique ) et ultra-microtomes (coupes histologiques dans le cas d’une étude ultrastucturale en microscopie électronique). Il est ouvert à tous les membres de l’INM, mais aussi à la communauté scientifique Montpelliéraine.

EQUIPEMENTS :

Cryostats Leica : 2 cryostats Leica (2800E Frigocut, CM3050) qui permettent de réaliser des coupes à congélation d’une épaisseur variant de 4 µm à 16 µm.

Ces cryostats sont des dispositifs cryogéniques qui permettent de maintenir une température allant de 10°C à -50°C, dans une zone d'expérimentation thermiquement isolée de l'extérieur. Un microtome est logé à l‘intérieur de cette enceinte et permet de réaliser des coupes dans des tissus durcis par la congélation (de 4 µm à 30 µm), sériées ou non sériées, sur tissus fixés ou non fixés.
Les applications en microscopie optique peuvent être diverses, allant de la simple coloration structurale, à l’immunohistochimie avec un choix de traceurs très variés : les fluochromes en marquages multiples, les enzymes en double marquages, l’or et l’argent colloïdal en double marquage. C’est aussi une technique de choix pour l’hybridation in situ.

 

 

Ultra-microtomes Leica : 2 ultracuts Leica qui permettent de réaliser des coupes semi-fines (de 0.5 µm à 2 µm) mais aussi des coupes ultrafines (de 50 à 100 nm) observables en microscopie électronique à transmission.
L’ultramicrotomie est essentielle à l’observation en microscopie électronique des organes intracellulaires (mitochondries, golgie, noyau,..). Les applications sont multiples : contrôles histologiques classiques mais aussi immunohistochimie en simple ou double marquage dites d’ « avant-inclusion ou après-inclusion » enzymatique, or colloïdal…

Petits matériels de coupes à disposition :

  Deux Knifes-maker Leica. Ces appareils servent à la fabrication de couteaux de verre pour l’ultramicrotomie avec une feuille de verre, découpée en forme de bandes spécialement choisies d’une largeur de 25 ou 38 mm.

Des couteaux de diamant fabriqués à partir de diamants bruts naturels. Ils sont utilisés pour la réalisation de coupes dont les épaisseurs varient de 30 à 250 nm pour les coupes ultrafines et de 250 nm à 5 µm pour les coupes semi-fines.

 Des grilles support pour les études en microscopie électronique.

PRESTATIONS :

Une technicienne « prestataire de service » à temps plein réalise des coupes à congélation à partir de différents tissus pour tous les membres de l’INM et les membres extérieurs (IFR3, U844, …) : muscle, os, cochlée, œil , moelle épinière, cerveau…

 

Globe oculaire

Des formations théoriques et techniques sont assurées à tous les membres de l’INM et à tous les utilisateurs extérieurs. Une documentation spécifique est à disposition de tous sur le site intranet de l’INM et sur Internet (en français et en Anglais). La réservation des différents appareils ainsi que les demandes de coupes de tissus s’effectuent « on line » sur le site Intranet. Une veille technologique est assurée pour mettre à la disposition des utilisateurs du matériel de qualité et de haute performance.

Epithélium olfactif  

LA JOUVENCE :

L’acquisition d’un nouvel appareil, Cryostat Leica (17K€), devrait permettre de répondre à la demande grandissante des utilisateurs actuels et futurs.

 Le plateau d’histologie/immunocytochimie/microtomie devrait être rattaché à la plate forme RIO avec l’arrivée prochaine du service de microscopie électronique. Cette restructuration va considérablement favoriser l’ouverture du plateau à toute la communauté scientifique montpelliéraine.

 

Cochlée

 

 

 

 

 

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