RIO Imaging             Iso 9001

La plateforme d’imagerie de l’Institut des Neurosciences de Montpellier  fait partie depuis sa création en 2004 de la plateforme régionale d’imagerie Montpellier Rio Imagerie (MRI : www.mri.cnrs.fr). Elle réunit des compétences scientifiques et techniques dédiées à l’imagerie en neuroscience. En outre, la plateforme abrite différents appareils de pointe en microscopie d'échantillons fixés ou vivants, ainsi que des solutions d'analyse d'images. Elle est certifié ISO 9001 : 2008 (LRQA) et labellisée IBISA (Infrastructures Biologie Santé et Agronomie : www.ibisa.net). La plateforme est ouverte aux laboratoires extérieurs publics et privés.

Nos missions sont multiples :

    • Mise à dispositions de postes de microscopie et d’analyse d’images.
    • Aide à la préparation et à l’observation des échantillons.
    • Adaptation et mise au point de nouvelles applications in vitro et in vivo.
    • Automatisation de traitement d’images.
    • Expertise
    • Formation et Enseignement

1. MICROSCOPIE MULTI-PHOTONIQUE

Zeiss LSM 7MP / OPO


ZeissLSM7MP OPOMicroscope multi-photon sur statif droit Zeiss AxioExaminer. Système équipé d’un laser multi-photon Chameleon Ultra II de Coherent (gamme de longueur d’onde entre 680 et 1080nm) couplé à un Chameleon Compact OPO (Optical Parametric Oscillator) de Coherent (gamme de longueur d’onde entre 1000 et 1300nm). 4 détecteurs : 2PMT NDD classiques et 2 PMT BiG avec comptage de photons possible. Contrôle environnemental avec une enceinte thermostatée. Cet équipement est destiné à différentes applications d’imagerie multi-photonique :

    •  Imagerie in vivo multi-dimensionnelle, multi-couleur
    • Imagerie sur petit animal
    • Fluorescence, SGH, TGH


2. MICROSCOPIE CONFOCALE

Confocal 1 Zeiss LSM 700

Confocal1ZeissLSM 700


Le LSM 700 est confocal  balayage laser (point scaning) avec un seul pihole. Un Dichroïque secondaire (VSD : Variable Secondary Dichroic de 400 à 700nm), sépare la lumière d’émission entre deux détecteur (PMT). Il est piloté par le logiciel Zen.


  

    • Echantillons fixés
    • Imagerie multi-dimensionnelle, multi-couleur
    • Excitation : diodes laser  à 488nm, 555nm et 633nm
    • Détection : 2 PMT pour la fluorescence
    • Microscope: Zeiss Axio Observer inverse entièrement motorisé


Confocal 2 Zeiss LSM 5 Live DUO

Confocal2ZeissLSM 5Live DUOConfocal Zeiss 5 Live DUO équipé de deux types de système de balayage. D’une part, l’un conventionnel relativement lent permettra de faire de l’imagerie multidimensionnelle sur les tissus fixés. D’autre part, l’autre de type balayage rapide (120 images/sec en 512*512) pour les études sur objets biologiques vivants. C’est un outil adapté pour l’observation des processus dynamiques rapides sur des préparations vivantes délicates, telles que les cellules nerveuses.

 

    • Echantillons vivants et fixés
    • Imagerie spectrale
    • 3D, 4D, imagerie rapide
    • Platine motorisée (mosaïques, multi-positions)
    • Chambre thermostatée (37°C 5% CO2)
    • Excitation : diodes laser  à 405nm, 488nm, 545 nm, 561nm, 633nm  et Laser Argon (458, 470, 488, 515nm)
    • Detection : 3 PMT pour fluorescence et 1 PMT en transmission
    • Microscope : Axioobserver


Confocal 3 Leica SP5 X  

Confocal 3 Leica SP5 X

Confocal Leica SP5 équipé d’un  Laser Blanc Supercontinuum - AOBS - Détecteurs spectraux. Permet de sélectionner la longueur d'onde d'excitation au nanomètre près, le choix de la bande d'émission collectée, la possibilité d'exciter jusqu'à 8 raies simultanément sans avoir à changer de dichroïque.

 

    • Echantillons vivants et fixés
    • Imagerie spectrale à l’excitation et à l’émission
    • Excitation : diodes laser  à 405nm, Laser blanc (470nm-670nm)
    • Détection : 3 PMT pour fluorescence et 1 PMT en transmission
    • Microscope : DMI6000


3. MICROSCOPIE A CHAMP LARGE

Widefield 1 - Zeiss Axioimager Z1 / Zen

Widefield 1


Microscope  droit Zeiss AxioImager Z1 entièrement motorisé et équipé d’un module Apotome et d’une caméra Axiocam MRm.  Dédié à l’acquisition des images d'échantillons fixes aussi bien en fluorescence qu’en fond clair. Le module Apotome permet de réaliser très rapidement des coupes optiques à travers des échantillons biologiques marqués par fluorescence.

 

    • Échantillons fixés
    • Module Apotome
    • Contraste de phase, DIC, Fluorescence

Widefield 2 - Zeiss Axioimager D1 / Axiovision 

Widefield 2



Microscope droit Zeiss AxioImager D1équipé d’une camera CCD couleur  AxioCam MRc. Dédié à l’acquisition des images d'échantillons fixes aussi bien en fluorescence qu’en fond clair.

 

 

    • Échantillons fixés
    • Brightfield, DIC, fluorescence

Widefield 3 - Zeiss Axiovert 200M / Metamorph

Widefield 3Microscope entièrement automatisé Zeiss Axiovert 200 M équipé d’une chambre à atmosphère contrôlée, d’une platine motorisée et d’une caméra (Roper Micromax). Piloté par le logiciel MetaMorph (Universal Imaging), il permet de suivre pendant plusieurs jours des cultures cellulaires dans des boîtes de 6 et 12 puits, en lumière blanche et en fluorescence à raison de 1 à 122 champs par puits séparés ou contigus (image mosaïque).

    • Échantillons vivants
    • Chambre thermostatée (37°C 5% CO2)
    • Contraste de phase, DIC, Fluorescence

Widefield 4 - Zeiss Axiovert 200 / Metafluor

Widefield 4

Station développée sur la base d’un microscope inversé Zeiss Axiovert 200, un changeur de longueur d’onde rapide (Sutter Lambda DG-4) et une caméra CoolSnap ES. Le système, piloté par le logiciel MetaFluor (Universal Imaging), permet d’observer la réponse de plusieurs neurones en même temps avec une fréquence de 3-4 images par seconde.


    • Échantillons vivants
    • Imagerie calcique
    • Perfusion du milieu
    • Contraste de phase, DIC, Fluorescence


4. LAMES VIRTUELLES

DigitalSlideScanner

Systèmes d'imagerie à haut rendement, un automate, entièrement dédié au marquage immuno-histologique (image couleur). Outils indispensables pour les études de toxicité et le screening à haut débit et le stockage des lames virtuelles après coloration ou immunomarquage.

 

    • Acquisition automatique (210 lames)
    • Coloration histologie (images couleurs)
    • Fluorescence
    • Prestations de service pour la numérisation des lames histologiques en fond clair ou en fluorescence.


 5. MACROSCOPIE

ZeissDiscoveryV20

Dédié à des échantillons de taille importante (Petits organismes, coupes entières de tissus…). Permet d’imager des objets de grandes dimensions. Le Discovery permet de concilier optiquement un grand champ d’observation, une excellente résolution, des distances de travail importantes, une large plage de grossissements. Il permet de travailler en fond clair, en fond noir et en fluorescence.

 

    • Objectifs  avec grande distance de travail
    • LED transmitted illumination
    • LED reflected brightfield illumination


6. ANALYSES D’IMAGES

Deux ordinateurs d’analyse permettent l’exploitation des images avec des logiciels tels que Metamoph, Axiovision, Definiens, Image J, Imaris, Volocity, Huygens. De plus la plateforme propose son expertise pour le traitement et l’analyse d’images sous Definiens.

    • Déconvolution
    • Reconstruction des images 3D
    • Visualisation
    • Quantification
    • Segmentation
    • Tracking
    • Co-localisation