La plateforme permet d’accueillir toutes personnes de l’INM et de l’extérieur (chercheurs, doctorants, post-doctorants, étudiants, ITA et stagiaires) qui désirent réaliser des hybridations in situ et des PCR en temps réel soit d’une façon soutenue ou occasionnelle.

La responsable de la plateforme d'expression génique assure :

- l’organisation et la gestion de la plateforme
- la coordination des différents utilisateurs
- le conseil et l’orientation des futurs utilisateurs
- la formation des nouveaux utilisateurs à la technique d’hybridation in situ (de la préparation des sondes jusqu’au marquage) et de PCR en temps réel
- l’évolution et les mises au point des méthodologies

1. Hybridation in situ

Les utilisateurs ont à leur disposition tout le matériel nécessaire à la réalisation d’hybridation in situ sur tissus entiers ou sur coupes (étuve, bain marie et sec, micropipettes, four à hybridation, sorbonne, microscope optique pour suivre la révélation et tout le petit matériel) et le consommable.

Expression gnique extraction ARNt

 

La pièce dédiée à l’hybridation in situ est une pièce RNase free où les utilisateurs ont à leur disposition le matériel pour réaliser les extractions d’ARN (broyeur polytron, ultraturax, centrifugeuse).


 


Protocoles disponibles :

    • Hybridation in situ simple marquage
    • Double hybridation in situ
    • Hybridation in situ couplée à un marquage immunohistochimique
    • Hybridation in situ des microRNA
    • Double hybridation in situ fluorescente

EXEMPLES DE MARQUAGES SUR LES DIFFERENTS TISSUS
ETUDIES A l’INM

Venteo-retine           venteo-cochlee               venteo-moelle-epiniere

          Rétine                                             Cochlée                        Moelle épinière et Ganglions Rachidiens Dorsaux

venteo-nerf          Hybrid 3                Hybrid 6

          Nerf                                  Double hybridation in situ      Hybridation in situ couplée à un immuno-marquage


2. PCR en temps réel


Les utilisateurs ont à leur disposition tout le matériel nécessaire à la réalisation de PCR en temps réel :

                      Light Cycler 2.0 32 capillaires                              Light Cycler 480 plaques 96 puits

           Expression gnique LC2.0                  Expression gnique LC480

La pièce DNA free est dédiée à la préparation des réactions de PCR sans l'ajout des matrices ADN.


3. Enseignement

Poster Formation




Formations nationales dispensées dans le cadre de la Formation Permanente de l’INSERM en 2008 et 2012.

La prochaine session est programmée en octobre 2014.

 





Publications principales

Coque E et al., Proc Natl Acad Sci USA pii: 201815961, 2018
Enault S et al., BMC Evol Biol. 30;18(1):127, 2018
Rivat C et al., Nat Commun. 9:1042, 2018
Ventéo S et al., Sci Rep. 6:36407, 2016
Ohayon D et al., Cell Rep. 17:1473-1481, 2016
Bouilloux F et al., Elife Feb 8;5. pii: e11627, 2016
Ohayon D et al., Dev Cell. 33:343-50, 2015
Enault S et al., Front Genet 15;6:283, 2015
Elzière L et al., PLoS ONE 19:e97736, 2014
Ventéo S et al., PlosOne 7(1):e29852, 2012
Wende H et al., Science 335(6074):1373-6, 2012
Dalet A et al., PlosOne 7(9):e46261, 2012
Fasquelle L et al., J Biol Chem 13;286(19):17383-97, 2011
Grimal S et al., Glia 58(16):1977-87, 2010

 

Contact

Ventéo Stéphanie